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细胞因子重组需要满足哪些要求?点击次数:337 发布时间:2019-06-18

        细胞因子是免疫原、丝裂原或其他刺激剂诱导多种细胞产生的低分子量可溶性蛋白质,具有调节固有免疫和适应性免疫、血细胞生成、细胞生长、APSC多能细胞以及损伤组织修复等多种功能。细胞因子可被分为白细胞介素、干扰素、肿瘤坏死因子超家族、集落刺激因子、趋化因子、生长因子等。
  重组细胞因子要求:
  1.真实性:重组蛋白产品一致经过N末端氨基酸序列分析;必要时应用SDS-PAGE,RP-HPLC和质谱(MS)检测其真实性。
  2.纯度:应用SDS-PAGE和RP-HPLC方法分析产品纯度。
  3.生物活性:进行相应的体外(in vitro)或体内(in vivo)活性检测。
  4.蛋白含量:通过紫外光谱分析,SDS-PAGE电泳检测;必要时应用HPLC定量标准蛋白溶液。
  5.内毒素:kinetic LAL法检测内毒素。
  6.微生物:重组蛋白在装瓶之前都经过滤除菌处理。
  重组细胞因子的状态:
  市场上主流的重组蛋白产品,多在不含载体蛋白或其他添加物(如BSA、HAS、蔗糖等)的条件下,以低盐的形式做冻干处理,因此微量(多以微克计量)的细胞因子在冻干过程中会沉积于管内,形成很薄或不可见的蛋白层,所以建议在收到试剂后,务必于开盖前先离心20-30秒,使可能附于管盖或管壁的蛋白成分聚集于冻干馆的底部(此时能否见到白色沉淀均属正常现象)。
徐小姐
朱小姐
 
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